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徠卡顯微鏡神經學的應用
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北京長恒榮創科技

時間 : 2020-09-24 12:59 瀏覽量 : 422

    徠卡顯微鏡神經學的應用

    與急性切片的準備工作

    作為一個嚴格的監管,高度復雜的細胞網絡的神經系統。除了獲得知識網絡的單個單元,神經元細胞,了解,作為一個整體的網絡是非常重要的,完成的圖片神經元溝通。為研究神經元網絡活動的方法之一是使用厚的片制劑(約300微米)的神經組織,因為大多數的研究軸突切片內的細胞之間的連接保持在這樣的保守的準備工作。

    方便切片的制備與徠卡體視顯微鏡

    急性切片進行活細胞成像和/或膜片鉗編制是一個非常耗時的過程。與細膩的組織切片工作需要極大的耐心,經驗和柔和處理的樣品,以避免干擾的神經網絡振動或其他物理壓力。在籌備過程中一個可靠,精確和方便使用的儀器以優異的光學,像徠卡立體顯微鏡,有助于更大限度地減少應力,試樣和實驗者。

    在實驗過程中避免震動

    避免生理上的壓力繼續一次切片的標本已經轉移到實際的膜片鉗設置。這里,顯微鏡的任何操作(例如,改變物鏡,使用滑塊,聚焦等)可以擾亂軸突內的切片或所獲取的膜片鉗配置的連接。

    徠卡DM6000FS固定臺顯微鏡是專為片準備工作。由于它的智能機動化,它可以讓所有的顯微鏡功能,對比的方法來改變放大倍率之間切換,操作沒有觸摸顯微鏡,導致無振動實驗傳導。

    智能自動化節省時間和資源

    因此,優化的自動化概念保存樣品從意外中斷,從而節省時間和資源。由于所有的載流元件被關閉,如果不使用,徠卡DM6000FS提供超高的電子穩定演唱會與光學和機械穩定性。結合徠卡IRAPOHCX25X,0.95nA水浸物鏡,這使得放大倍率轉換器使用,而不是改變物鏡,徠卡DM6000FS固定臺顯微鏡,膜片鉗和活細胞成像的更佳選擇片的準備。

    綠色熒光蛋白標記的嗅感覺神經元

    1.鈣染料型Fluo-4負載細胞綠色熒光蛋白標記的嗅感覺神經元的鼠標主要嗅覺上皮細胞在急性片(微分干涉對比)。圖片由danielaFlügge博士,亞琛工業大學亞琛大學,德國。

    2.徠卡DM6000Fs的固定臺顯微鏡是一個完全自動化的高端研究儀器適用于先進的成像實驗,除了電工作。憑借其智能的自動化概念,在顯微鏡的所有操作(例如,物鏡/變倍,聚焦,對比的方法之間切換)正在進行的實驗過程中進行,而不會造成任何振動。由于所有的載流徠卡DM6000Fs的元素和電動機被關斷,如果在不使用,固定舞臺顯微鏡有助于消除電氣噪聲的膜片鉗安裝。

    3.徠卡HCXIRAPOI25x/0.95W的高水浸物鏡是特別設計用于電的應用程序和近紅外DIC。它結合了一個相對低放大倍數(25倍),具有高數值孔徑(0.95),它允許使用沒有得到空放大的倍率換。因此,物鏡幾乎已經過時了。此外,物鏡上有一個非常陡峭的角度(41°)一個很長的自由工作距離(2.5毫米),以確保方便地訪問的移液管到樣品中。

    4.鈣染料型Fluo-4負載細胞在急性小鼠主片的共焦圖象嗅上皮活細胞成像用LeicaDM6000CFS固定階段收購顯微鏡。圖片由danielaFlügge博士,德國亞琛工業大學。

    相差與星形膠質細胞

    1.GFP標記的嗅感覺神經元相差與星形膠質細胞的共培養的海馬神經元中的對比度的圖像?!把a丁-移液管連接到準備用于記錄的細胞。圖片由AinharaAguado博士,德國波鴻魯爾大學。

    2.徠卡倒置顯微鏡DMI系列是完美的工具來執行養殖或其他貼壁細胞的電生理和活細胞成像。有了模型從非機動車全電動版本,所有的需求都包括在內。

    結合設備像徠卡快的濾光輪,量身定制的孵化室,機動階段,用戶友好,功能強大的LASAF軟件,你可以建立補丁夾緊和/或成像設置,完全滿足您的要求。

    3.徠卡快速外部濾光輪的波長進行快速無振動的變化在24毫秒之內(相鄰位置),使他們的更快的濾光輪市場。四濾光輪,可同時與5個可自由定義的位置激發和更大的靈活性的排放側和一個偉大的上不同的應用程序的數量。由于我們的成像設備(如攝像機,過濾器通過LASAF輪轂,百葉窗)時性操作的特殊的音序器電路板軟件,只需點擊幾下鼠標,我們提供超高的成像速度。

    4.GFP標記的嗅感覺神經元的急性分離。圖片來源:Jenniferspehr博士,德國亞琛工業大學。

    徠卡神經學顯微鏡

    神經學系統

    徠卡顯微鏡神經學的應用

    貼壁培養或游離細胞工作

    膜片鉗或活細胞成像的貼壁細胞主要有兩個原因:一是為了獲得一個特定的培養或新鮮分離的細胞類型的細胞生理信息,另一種是內獲取信息的特定分子的行為一個生理過程,例如離子通道的信號級聯。對于第一個,感興趣的身體是培養或解離的細胞本身。對于后者,該信元類型起的作用不大,作為重點是在特定的生理過程中可能發生的各種細胞中,或可能被模仿在一個易于培養商業的感興趣的基因的轉染細胞系。

    培養或游離細胞是完美的樣本進行活細胞成像

    培養(或分離的)貼壁細胞生理研究的一個優勢是,這些細胞通常存在于單細胞層和方便灌注的物質(如酶抑制劑或激活的離子通道)。此外,這些標本產生的雜散光與熒光激發光,從而縮短曝光時間。這節省了從光漂白的和有害的照射,這是有利的兩個高速成像和長期活細胞成像實驗樣品。

    適合活細胞倒置顯微鏡工作

    大多保持在培養皿培養或游離細胞。這意味著,倒置顯微鏡可以用來進行活細胞成像或膜片鉗實驗。方便工作與培養皿倒置顯微鏡和周圍的樣品,提供了很大的空間,足夠的的多種微量移液器,吸,灌注針頭及其他設備的位置。

    此外,細胞膜片鉗移液器執行電生理實驗很容易訪問的。

    設計您的顯微鏡設置

    徠卡顯微系統提供一個完全自動化的版本等高端應用相結合的補丁夾緊范圍從非電動的版本為常規應用(徠卡DMI3000B),通過先進的應用程序的完全編碼和部分電動顯微鏡(LEICADMI4000B)倒置顯微鏡和高速多通道活細胞成像(徠卡DMI6000B)。

    外圍設備,如超高速外部濾波器輪(波長切換,在不到24毫秒)和量身定制的氣候室,使您的活細胞成像顯微鏡的研究了高端的設置。

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