使用尼康 TS2 顯微鏡觀察動物細胞細胞器分布，一般有以下步驟：

尼康 TS2 顯微鏡樣品制備

細胞培養：選取合適的動物細胞系，如 HeLa 細胞，在含有適宜營養成分的培養基中，于培養箱內培養，使細胞處于良好的生長狀態。

細胞固定：當細胞生長至對數生長期時，用胰蛋白酶將細胞從培養瓶壁消化下來，制成細胞懸液。然后將細胞懸液滴加在載玻片上，待細胞貼附后，使用 4% 多聚甲醛溶液對細胞進行固定，一般固定 15 - 30 分鐘，以保持細胞的形態和細胞器的結構。

細胞通透：用含有 0.1% Triton X - 100 的 PBS 溶液處理細胞，作用 5 - 10 分鐘，使細胞膜具有通透性，便于抗體等試劑進入細胞與細胞器結合。

封閉：將載玻片放入含有 5% 牛血清白蛋白（BSA）的 PBS 溶液中，室溫封閉 30 分鐘，以減少非特異性結合。

尼康 TS2 顯微鏡抗體孵育：

加入針對特定細胞器的一抗，如抗線粒體的抗體、抗內質網的抗體等，4℃孵育過夜。一抗能夠特異性地結合到相應的細胞器上。

用 PBS 溶液洗滌載玻片 3 次，每次 5 分鐘，以去除未結合的一抗。

加入與一抗對應的熒光標記二抗，室溫孵育 1 - 2 小時。二抗可以與一抗結合，從而使細胞器被熒光標記，便于在顯微鏡下觀察。

再次用 PBS 溶液洗滌載玻片 3 次，每次 5 分鐘，去除未結合的二抗。

細胞核染色：用含有 DAPI（4',6 - 二脒基 - 2 - 苯基吲哚）的染液對細胞進行染色，DAPI 可以特異性地結合到細胞核的 DNA 上，使其發出藍色熒光，從而標記出細胞核的位置。染色時間一般為 5 - 10 分鐘，然后用 PBS 溶液洗滌 1 - 2 次。

封片：在載玻片上滴加適量的抗熒光淬滅封片劑，然后蓋上蓋玻片，盡量避免產生氣泡。封片劑可以減少熒光的淬滅，使觀察效果更好。

尼康 TS2 顯微鏡顯微鏡設置

光源選擇：尼康 TS2 顯微鏡通常配備有汞燈或 LED 光源。對于熒光觀察，根據所使用的熒光染料的激發波長，選擇合適的激發光濾光片組，并打開相應的光源。例如，觀察 DAPI 標記的細胞核，需要使用紫外光激發；觀察常見的綠色熒光蛋白（GFP）標記的細胞器，一般使用藍光激發。

物鏡選擇：根據觀察的需求和細胞的大小，選擇合適的物鏡。低倍物鏡（如 10×、20×）可以用于觀察細胞的整體形態和分布，高倍物鏡（如 40×、63×、100×）則可以更清晰地觀察細胞器的細節。對于觀察細胞器分布，通常需要使用高倍物鏡，以獲得足夠的分辨率。

光路調整：

開啟光源后，通過調節聚光鏡的高度和孔徑光闌的大小，使光線均勻地照射在樣品上。對于高倍物鏡，可能需要適當減小孔徑光闌，以提高圖像的對比度。

使用熒光觀察時，需要通過調節熒光光路中的反射鏡和透鏡，使激發光準確地照射在樣品上，并使發射的熒光能夠有效地被收集和成像。

尼康 TS2 顯微鏡觀察與分析

找到細胞：將制備好的樣品放在顯微鏡載物臺上，使用低倍物鏡找到細胞群體。通過調節粗準焦螺旋和細準焦螺旋，使細胞圖像清晰聚焦?？梢砸苿虞d物臺，選擇細胞分布均勻、形態良好的區域進行觀察。

切換到高倍物鏡：在低倍物鏡下確定好觀察區域后，小心地切換到高倍物鏡。由于高倍物鏡的工作距離較短，切換時要注意避免物鏡碰到樣品。切換后，再次微調細準焦螺旋，使細胞器的圖像達到最佳清晰度。

觀察細胞器分布：根據不同熒光標記的顏色和位置，觀察各種細胞器在細胞內的分布情況。例如，線粒體通常呈現為紅色或綠色的點狀或線狀結構，分布在細胞質中；內質網可能呈現為網絡狀結構，分布在細胞核周圍和細胞質中；高爾基體則通常表現為靠近細胞核的一些囊泡狀或扁平囊狀結構。

圖像采集與分析：使用顯微鏡自帶的成像系統，如 CCD 或 CMOS 相機，采集細胞和細胞器的圖像。可以對采集到的圖像進行分析，例如使用圖像分析軟件測量細胞器的大小、數量、分布密度等參數，還可以通過對不同熒光通道的圖像進行疊加和分析，研究不同細胞器之間的相互關系和空間分布規律。