什么是適合我的研究顯微鏡？本文為您簡要概述了選擇光學研究顯微鏡時應記住的主要功能。
研究顯微鏡-Leica-DMi8
一種光學顯微鏡常常是在生命科學領域的研究實驗室中心設備之一。它可以用于各種應用，這些應用揭示了許多科學問題。因此，顯微鏡的配置和功能對其應用范圍至關重要，范圍從明場到熒光顯微鏡再到活細胞成像。
本文簡要概述了相關顯微鏡的功能，并總結了選擇研究顯微鏡時應考慮的關鍵問題。
您使用哪種標本？
選擇研究顯微鏡時首先要考慮的事情之一就是要探索的標本類型。對于固定在薄載玻片上的固定樣品，可以使用立式顯微鏡?；罴毎枰@微鏡的特殊特征，因為它們被保存在充滿細胞培養基的相對較大的細胞培養容器中。
只有倒置的配置，物鏡在樣品下方，聚光鏡在樣品上方，才有助于基本的自由空間和物鏡與樣品的所需接近程度。同時，倒置顯微鏡對細胞保持良好的可及性，例如添加微操縱器。
此外，活細胞需要足夠的環境才能生存。溫度和CO2濃度必須保持在一定水平。一個氣候室與相應的控制器要完成這個任務。
您如何看待？
微觀樣本擴展為三個維度：長度，寬度和高度。盡管某些標本（例如組織切片）僅在xy方向上成像，但還有其他一些應用也要求在z維度上進行采集。要對3D體積（例如活細胞）成像，建議使用電動物鏡左輪手槍，它可以逐步引導您的樣品通過焦點。成像軟件應該能夠重建單個圖像以進行3D可視化。
對于活細胞，必須添加維度時間。在這種情況下，例如系統穩定性是另一個關鍵特征。由于溫度變化會影響采集期間的成像系統，因此必須采取有效的對策。諸如自適應聚焦控制（AFC）之類的自動聚焦調節可抵消這些熱影響，并始終找到預定義的聚焦。
自適應焦點控制
自適應焦點控制（AFC）還可在長期延時采集過程中自動穩定顯微鏡焦點。傳感器檢測LED光束（850nm）的運動，該運動在載有樣品的蓋玻片例如由于熱活動而改變其位置時發生。
哪種對比方法適合您的樣品？
用顯微鏡研究的大多數細胞，尤其是動物細胞，沒有足夠的固有對比度，無法看到精細的細節。研究人員使用對比方法來解決此問題。而相差（PH）和微分干涉對比（DIC）操縱通過試樣光通過添加此相反，也可以用它染色的熒光染料（免疫熒光）分別使用熒光蛋白。
根據對比方法，顯微鏡需要特定的設備。例如，相位對比需要特殊的物鏡，而DIC使用某些棱鏡，這些棱鏡必須切換到光路中。對于熒光顯微鏡，您需要特殊的濾光塊，以允許正確的光波長進入和離開樣品。
從左到右：明場，DIC，相襯，熒光
對比方法的選擇也決定了光源。傳統的明場顯微鏡，相差和DIC的透射光照明可以使用鹵素或LED照明進行?？梢允褂肔ED照明或借助汞，氙或汞金屬鹵化物燈進行熒光顯微鏡檢查。
您要記錄或發布結果嗎？
如果要拍攝標本圖像或進行活細胞成像，則需要數碼顯微鏡相機。特別是在熒光活細胞成像的情況下，建議使用靈敏的攝像頭以最小化可能傷害細胞的激發光量。除了成熟的CCD和EMDDC相機外，如今sCMOS相機也因其高量子效率和采集速度而得以應用。有關數碼顯微鏡相機的更多信息，請閱讀文章“數碼相機技術簡介”。
此外，大視野（FOV）有助于更快地找到有趣的區域并同時成像更多的細胞?，F代研究顯微鏡的相機端口具有19mmFOV，與19mmsCMOS相機芯片無縫匹配。
通常，僅拍攝標本圖像，然后分析所獲取的數據是不夠的。為此，易于使用的成像和分析軟件有助于獲取定量數據并進行可靠的數據分析。
您想在顯微鏡上操作細胞嗎？
在過去的幾年中，對標本進行照片處理變得很流行。這意味著研究人員不僅要觀察活細胞，還要借助光來操縱它們。光漂白后的熒光恢復（FRAP）是一個有助于解開動態細胞過程的例子。對于這些類型的操縱技術，通常需要其他光源，這些光源必須集成到顯微鏡的光路中。
這種方法并不簡單。LeicaInfinity端口是一種通用解決方案，可以將其他光源耦合到顯微鏡的光路中，而不會影響圖像質量，例如FRAP，光開關，消融或光遺傳學。有了合適的適配器，研究人員甚至可以耦合他們自己的設備。
你的預算是多少？
一個重要的問題是您可以花多少錢。一些顯微鏡供應商提供適合特殊應用的預定義配置。但是，如果您不需要購買的所有預配置組件怎么辦？因此，免費配置組件比購買預定義的顯微鏡系統便宜。
此外，對顯微鏡的要求可能會隨時間變化。在這種情況下，可升級系統具有某些優勢。通過預定義和固定的配置，您可以發現自己受限于有限的應用程序?？缮壭允鼓梢噪S需求的變化而自由增長。
考慮到這些因素，模塊化顯微鏡平臺（例如LeicaDMi8）使研究人員能夠從負擔得起的顯微鏡系統入手，該系統可以在以后升級并隨其需求增長。
誰將使用顯微鏡？
顯微鏡使用者的范圍可能非常不均勻。特別是在大學里，用戶可以是非常有經驗的或絕對的初學者。因此，由直觀軟件（例如LeicaApplicationSuiteX（LASX））運行的易于使用的顯微鏡系統有助于使人們快速入門并快速獲取數據。例如，面向工作流程的設計，圖像分析向導以及將外圍設備無縫集成到系統中，可以簡化您的工作。
除了廣角顯微鏡，立體顯微鏡還經常用于生命科學研究實驗室。
