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國產熒光顯微鏡細胞觀察
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北京長恒榮創科技

時間 : 2025-03-04 10:52 瀏覽量 : 24

以下是使用國產熒光顯微鏡進行細胞觀察的一般步驟:


國產熒光顯微鏡前期準備

儀器檢查:檢查熒光顯微鏡各部件是否齊全,如光源、物鏡、目鏡、濾光片、載物臺等,確保部件無損壞且能正常工作。

環境準備:選擇光線較暗的房間或使用窗簾等遮擋外部光線,避免環境光對熒光觀察造成干擾。


國產熒光顯微鏡樣品準備

細胞培養:根據實驗需求,培養好待觀察的細胞,可使用細胞培養瓶、培養皿或載玻片等進行培養。

熒光標記:選擇合適的熒光染料對細胞進行標記,如標記細胞核的 DAPI、標記細胞骨架的鬼筆環肽 - FITC 等。標記過程需嚴格按照染料說明書進行操作,包括染料濃度、孵育時間、溫度等條件的控制。

固定與封片:標記完成后,如需對細胞進行固定,可使用多聚甲醛、戊二醛等固定劑。固定完成后,用封片劑將細胞封片,防止細胞干燥和熒光淬滅。


國產熒光顯微鏡操作觀察

放置樣品:將載有細胞樣品的載玻片平穩放置在熒光顯微鏡的載物臺上,并用載物臺夾具固定好,確保樣品在觀察過程中不會移動。

選擇物鏡和目鏡:根據觀察需求,先選擇低倍物鏡(如 10 倍或 20 倍)進行初步觀察,找到細胞所在區域后,再切換到高倍物鏡(如 40 倍、60 倍或 100 倍)以獲得更清晰的圖像。

調節光源:打開熒光顯微鏡的電源,選擇合適的光源,并調節亮度和對比度。不同的熒光染料需要不同波長的激發光,需根據所使用的熒光染料選擇相應的激發濾光片和發射濾光片。

對焦與觀察

粗調焦:通過粗調焦旋鈕緩慢升高或降低載物臺,使細胞樣品接近物鏡,直到在目鏡中能看到模糊的細胞圖像。

微調焦:使用微調焦旋鈕精細調節焦距,使細胞圖像達到最清晰的狀態。在觀察過程中,可適當調整光源亮度、對比度以及濾光片組合,以獲得最佳的熒光成像效果。


國產熒光顯微鏡結果記錄與分析

拍照記錄:使用熒光顯微鏡自帶的成像系統或外接的數碼相機、CCD 相機等,對觀察到的細胞熒光圖像進行拍攝。拍攝時需注意選擇合適的曝光時間、增益等參數,避免圖像過亮或過暗,以及熒光淬滅。并選擇照片保存路徑并重命名,以免覆蓋之前的照片。

圖像分析:將拍攝的圖像導入到圖像處理軟件中,如 ImageJ、Photoshop 等,進行進一步的分析和處理,如測量細胞的大小、熒光強度、計算細胞數量等。根據實驗目的和要求,對圖像結果進行解讀和分析,得出相應的結論。


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